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转基因快速检测试纸

简要描述:转基因快速检测试纸用特异性抗 Cry1Ab/1Ac 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry1Ab/1Ac 单抗,双抗体夹心法检测 Cry1Ab/1Ac 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry1Ab/1Ac 蛋白。

  • 产品型号:EPSPSCP4
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-03-22
  • 访  问  量:3310

详细介绍

【 试剂盒原理】

     转基因快速检测试纸用特异性抗 Cry1Ab/1Ac 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry1Ab/1Ac 单抗,双抗体夹心法检测 Cry1Ab/1Ac 基因表达产物, 转基因快速检测试纸可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry1Ab/1Ac 蛋白。


【试剂盒组份(规格)】

预包被板(抗 Cry1Ab/1Ac 单抗)      12 孔×8

Cry1Ab/1Ac 酶标抗体                 12 ml×1 瓶

20×浓缩洗涤液                      30 ml×1 瓶

5×抽提液/稀释缓冲液                30 ml×1 瓶

底物液 A                            7 ml×1 瓶

底物液 B                            7 ml×1 瓶

终止液                              7 ml×1 瓶

使用说明书                          1 份

0ppb 阴性对照                       1ml

4 个不同浓度的标样:           

0.5 ppb 1.0 ppb 2.0 ppb 4.0 ppb          各 1ml


【试剂准备】

    试剂盒中的 20×浓缩洗涤液 30 ml 加 570 ml 灭菌 ddH2O 溶解稀释至 1×洗涤液,5×抽提液(30 ml)加 120 ml ddH2O 稀释至 1×抽提液,4℃存放备用。


【样品准备】

    称取约 20 mg 叶片,加 0.5 ml 1×抽提液(使用前 30 min 放置室温)研磨至匀浆,室温放置 30 min,测定前把样品上清液稀释 5-20 倍。

    测定茎干和胚乳中的 Bt 蛋白时,样品称取约 40 mg,加 1 ml 1×抽提液研磨。


【ELISA 反应】

1. 依次加 100 μl 阴性对照,标准品(4 个不同浓度的标样:0.5 ppb,1.0 ppb,2.0 ppb, 4.0 ppb)和待测样品至 96 孔板;

2. 用封口膜盖住 96 孔板,快速摇动平板混匀样品;

3. 37℃恒温箱孵育 30 min;

4. 倒掉 96 孔板中液体,每孔加入 1×洗涤液 250 μl 洗涤微孔板,洗板 5 次,用吸水纸拍干;

5. 按顺序在每个小孔中加入 100 μl Cry1Ab/1Ac 酶标抗体,然后重复步骤 2;

6. 37 ℃恒温箱孵育 30 min;

7. 倒掉 96 孔板中液体,每孔加入 1×洗涤液 250 μl 洗涤微孔板,洗板 5 次,用吸水纸拍干;

8. 依次加入 50 μl 底物 A 液,50 μl 底物 B 液,重复步骤 2;

9. 室温(20-25℃)避光孵育 10 min,加 50 μl 终止液,充分混匀终止反应,15min 以内在酶标仪上读取结果。 在 450 nm 为主波长,630 nm 为次波长(或单波长 450 nm)下,用空白孔校零,再读取各孔 OD 值。


【转基因测试盒使用注意事项】

1. 测定中需使用的所有试剂和 96 孔板提前 30 min 放置室温温育(否则会影响试验准确性),注意12 连管必须温育后再从平板上取下,未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存;

2. 试剂使用前应充分摇匀;

3. 摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染;

4. 使用洗涤液漂洗时,洗涤液需要填满每个小孔,进行充分漂洗;

5. 研磨好的样品如果不能一次全部测量,可以暂时在 4 ℃避光保存,但是最好在 24 h 内测定;

6. 结果判读请在反应终止后 15 min 内完成。


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