一、仪器定义与用途
托普云农转基因品种快速检测仪(典型型号TPJY-1)系国产现场级分子检测装备,以实时荧光定量PCR为核心检测手段,配合植物基因组DNA快速提取试剂与专用转基因筛查/转化体鉴定试剂盒,用于在非实验室场所(田间、粮库、种子企业、基层检测站)对玉米、大豆、水稻、棉花等农作物及其加工品中的外源转基因元件进行定性筛查及特定转化体的精准鉴定,亦可作为常规实时荧光PCR扩增仪使用。
二、检测原理
核酸提取:采用裂解—吸附—洗脱一步式快速提取法,常温下破碎植物组织(叶片或种子粉末)并选择性吸附基因组DNA,去除蛋白与多糖干扰,直接获取可用于扩增的模板。
实时荧光PCR扩增与检测:以TaqMan探针水解原理进行双重或多重靶标同步扩增——每一反应管同时设置内参基因(内源参照,如玉米zSSIIb、大豆Lectin)与外源转基因靶标(如35S、NOS、特定转化体基因)。PCR过程中荧光基团被探针水解而释放信号,仪器实时采集各通道荧光强度,依据Ct值判定阴阳性:内参基因扩增正常表明提取与扩增体系有效,外源靶标出现典型扩增曲线且Ct值小于预设 cutoff 值为阳性,无扩增或超出cutoff为阴性。
免疫层析快速筛查(配套试纸):对于现场初筛需求,可配合双抗体夹心胶体金免疫层析试纸条检测特定转基因表达蛋白,数分钟内完成定性初筛,与分子检测互为补充。
三、硬件结构与组成
热循环模块:半导体帕尔贴(Peltier)加热/制冷架构,PID算法温控,多阱独立均温设计,支持高速升降温循环与热盖防冷凝功能。
光学检测系统:双通道(或以上)固定式滤光片分光光路,LED激发光源配合光电二极管/CMOS探测器阵列,各孔同步荧光采集,无机械扫描部件。
人机交互:彩色触控屏嵌入式操作系统,引导式建板、程序编辑、实时扩增曲线显示及自动阴阳判定。
数据管理:内置存储器保存实验文件,支持USB导出、WiFi/4G无线传输及检测报告(含阴阳判定、Ct值、扩增图)直接打印或电子归档。
供电与便携性:交直流两用,整机紧凑轻量,适配现场便携箱携行。
配套组件:植物基因组DNA快速提取试剂、专用转基因多重筛查及转化体鉴定试剂盒、一次性研磨棒/迷你研磨器、八连管/单管等。
四、可检项目(典型范围)
筛查靶标:CaMV 35S启动子、NOS终止子、pat/bar基因、nptII等通用转基因元件。
转化体鉴定:常见商业化转化体特异序列(国产及进口玉米、大豆转化体依试剂盒版本覆盖)。
内参基因:玉米zSSIIb、大豆Lectin、水稻SPS等物种特异性内源参照基因。
免疫层析配套检测:Bt Cry1Ab/1Ac、Bt Cry2A、CP4-EPSPS等转基因表达蛋白定性初筛。
五、主要功能特点
1、 小巧轻便易携带:装备轻巧易携带,把实验室装进背包里,搬进农田。背上它,你可以在非标准实验室场景,随时随地进行实验室标准化检测。既确保了实验结果的科学性和准确性,又提高了工作效率。
2、快速检测、精准鉴定:相较于传统实验室基因检测,新型转基因快速检测仪通常只需要在30分钟以内,便可完成基因鉴定,并可对具体哪一种基因品种进行精准鉴定。大大缩短了检测过程的时间。
3、 数据真实可靠:该检测仪数据精准度与标准的PCR实验室检测(伯乐PCR实验数据)基本保持一致,确保了数据的一致性和可靠性。在保证经标准PCR方法结果准确可靠的基础上,实现技术升级,使其更集成,便捷,效率更高,成本更低。
4、 操作简单易上手:告别繁琐的样品处理、DNA提取等多实验步骤,前处理和快速检测试纸条步骤相似,全程免移液器操作,傻瓜式操作,易懂便捷,非专业人士也可进行操作。
5、 配置标准规范:基于专业实验室基础,新型转基因快速检测仪,采用专用的试剂盒(含快速提取试剂+PCR反应试剂),专用PCR仪(16通道)。
6、 提供技术保障:基于实时荧光PCR技术,制定了我国第一个现场快速PCR的标准,该技术设备,将为我国转基因产业化政府监管,育种企业品种保护提供技术支撑。
7、 应用场景广泛:一台多用,除了适用于玉米、大豆中转基因成分筛查及转化体快速鉴定,还可作为日常科研实验、实时荧光定量PCR使用,比常规PCR仪检测速度更快,操作更简单,节省一半以上科研时间。
六、适用场景
农业农村部门及市场监管部门对流通粮食、种子、饲料中转基因成分的现场监督抽查。
种子企业与育种单位开展品种真实性验证、亲本及商品种子转基因成分排查。
粮油加工企业原料入厂筛查与产品标识符合性自查。
科研院所开展田间取样后的快速初筛及分子标记验证实验。
七、操作注意事项与维护
DNA提取及加样过程应分区操作,防止气溶胶交叉污染导致假阳性,建议使用带滤芯吸头或一次性滴管并按规范更换。
内参基因必须扩增成功方可采信外源靶标阴性结论;若内参未出或Ct异常偏高,应检查提取质量或重新制样。
荧光检测通道须定期用空白对照校验背景值,长期停用应断开电源并按说明书遮盖防尘。
试剂盒及提取试剂严格按标示温度保存,反复冻融会降低酶活性与检测灵敏度。
胶体金试纸仅作定性初筛,阳性或争议样本应以PCR分子检测结果为准。
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